Mivel a protein peptid gyógyszerek többnyire bioaktív anyagok

Mivel a fehérjepeptid gyógyszerek többnyire bioaktív anyagok, és a biológiai aktivitás nemcsak a gyógyszer elsődleges szerkezetétől függ, hanem szorosan kapcsolódik a másodlagos és harmadlagos struktúrákhoz is, a bioassay egy egyedülálló és szükséges módszer ennek az osztálynak a farmakokinetikájának tanulmányozására. A biológiai teszteknek két célja van: közvetlenül meghatározni a testfolyadékokban lévő gyógyszerkoncentrációkat, és azonosítani a jelölt gyógyszerek biológiai aktivitását. Módszerei két fő kategóriába sorolhatók.
1.1.1 In vivo analízis Hagyományos egér vércukorszint-módszer inzulinnal stb., a különféle típusú fehérjepolipeptidek biológiai aktivitása alapján megállapított különböző módszereken túlmenően, mint pl. az IL-8 mobilizációs neutrofilek nyúlkísérletekben, a szerint. az IL-8 természetétől függően nagyszámú neutrofilt képes mobilizálni a csontból [1]. Ez a fajta módszer a legintuitívabban tükrözi a biológiai aktivitást, de az egész állatot érinti, idő- és munkaigényes, alacsony érzékenységgel és nagy eltérésekkel rendelkezik.
1.1.2 Az in vivo szövet (sejt) elemzés, mint például az NGF serkenti a csirke hátsó gyökér ganglionjainak növekedését, oxitocin patkány ex vivo uterin módszerrel stb. A molekuláris biológia fejlődésével számos specifikus és érzékeny függő sejtvonal jött létre, és a sejttenyésztés vált a legelterjedtebb módszerré. A fehérjepeptidek sejtekkel való kölcsönhatásának különböző mechanizmusai szerint számos specifikus művelet létezik. Ilyenek a proliferációs vizsgálatok, amelyek gyorsak és érzékenyek, de valamivel kevésbé specifikusak; Antiproliferáció, mint minden, az észlelési rendszer egyszerű, érzékeny és specifikus; A vírusellenes hatású gyógyszereken, például az interferonon alapuló citopátiás hatáscsökkentési vizsgálatok [2] megvédik a sejteket a víruskárosodástól, a módszer intuitív és érzékeny, de peptid altípusok zavarhatják. A fenti módszerek a sejtek számának növelésén és csökkentésén alapulnak, mint mennyiségi és effektív indikátorok, és a számlálási módszerek közé tartozik a direkt számlálási módszer és az indirekt számlálási módszer, utóbbi az MTT módszer, az izotóp (3H, 14C) beépülési módszer stb. Ezenkívül léteznek olyan tesztek, amelyek a tojásfehérje-polipeptidek sejtekkel való közvetett kölcsönhatásán alapulnak, például antitest-indukciós módszer immundetektálással kombinálva [3], enzim-indukált lebontási módszer enzimreakcióval kombinálva [4] és így tovább. Általánosságban elmondható, hogy a sejttenyésztési módszerek előnye az érzékenység és a specificitás, az objektivitás és a megbízhatóság, de nyilvánvalóak a hiányosságaik is. Először is, a biológiai tesztekkel nem lehet számszerűsíteni az inaktív kis metabolitokat, és nyomon követni azok dinamikáját in vivo; Másodszor, a minták többnyire emberi vagy állati szérumban találhatók, és a szérumban lévő endogén anyagok interferenciája és az esetleges endogén tényezők keresztreakciója befolyásolja a módszer specifitását. Továbbá gyakran küszöbérték citokinekre van szükség a biológiai folyamatok elindításához, ami csökkenti a módszer érzékenységét; A függő törzssejtek hosszú távú tenyésztése hajlamos a mutációra, amely befolyásolja a vizsgálat specifitását.